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BUNSEN ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)條件選擇及原裝分裝區(qū)別介紹
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)條件選擇:
在ELISA試劑盒中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括;
固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目較為滿意的供氫體。進(jìn)口ELISA試劑盒底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用加入。
ELISA試劑盒原裝分裝區(qū)別:
ELISA試劑盒原裝分裝的區(qū)別國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒以多年的出售經(jīng)歷來(lái)看分裝商品整體來(lái)說(shuō)與原裝質(zhì)量不同不大,更具有原裝所沒(méi)有的兩大特色。
比較原裝分裝所具有的兩大特色
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分裝比原裝報(bào)價(jià)低許多,從客戶的視點(diǎn)來(lái)看主要的仍是試驗(yàn)作用,分裝商品質(zhì)量與原裝不同不大,某些視點(diǎn)來(lái)說(shuō)分裝仍是十分合適客戶運(yùn)用的
選購(gòu)分裝需求留意的疑問(wèn)
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