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TAE緩沖液與TBE緩沖液的作用區(qū)別
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的電泳緩沖液主要有三種:TAE、TBE和TPE。TBE與TPE緩沖容量高,DNA分離效果好,但TPE會(huì)導(dǎo)致DNA片段回收時(shí)含磷酸鹽濃度高,容易使DNA沉淀。TAE緩沖容量低,但價(jià)格較便宜,TBE緩沖液含有的EDTA可螯合二價(jià)陽離子,可抑制DNase活性,防止PCR擴(kuò)增產(chǎn)物降解。天津本生小編詳解如下:
TAE緩沖液的特點(diǎn):
TAE是使用泛的緩沖系統(tǒng)。其特點(diǎn)是超螺旋在其中電泳時(shí)更符合實(shí)際相對(duì)分子質(zhì)量(TBE中電泳時(shí)測(cè)出的相對(duì)分子質(zhì)量會(huì)大于實(shí)際分子質(zhì)量),且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%,電泳大于13kb的片段時(shí)用TAE緩沖液將取得更好的分離效果,此外,回收DNA片段時(shí)也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。TAE的缺點(diǎn)是緩沖容量小,長時(shí)間電泳(如過夜)不可選用,除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換。
TBE緩沖液的特點(diǎn):
TBE 緩沖液也是常用的核酸電泳緩沖鹽溶液,主要用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳。TBE的主要成分是Tris-硼酸鹽與EDTA,緩沖能力強(qiáng),適合較長時(shí)間電泳,分辨率較高,電泳小于1kb的片段時(shí)分離效果好。TBE 緩沖液中的硼酸成分會(huì)影響DNA回收效率以及后續(xù)的酶反應(yīng),TBE用于瓊脂糖凝膠時(shí)易造成高電滲作用,并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價(jià)結(jié)合的四羥基硼酸鹽復(fù)合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收電泳中使用。若要進(jìn)行DNA片段的瓊脂糖凝膠電泳回收實(shí)驗(yàn),建議使用TAE 緩沖液。
北京索萊寶科技有限公司自產(chǎn)產(chǎn)品5×TBE緩沖液和50×TAE 緩沖液,貨號(hào)分別為T1050和T1060,5×TBE緩沖液為5×濃縮液,工作濃度為0.5×,可直接用蒸餾水稀釋10倍后使用。50×TAE 緩沖液為 50×濃縮液,工作濃度為 1×,可直接用蒸餾水稀釋 50 倍后使用。若產(chǎn)品出現(xiàn)沉淀析出,請(qǐng)置于 37℃水浴使其溶解,不影響使用及實(shí)驗(yàn)效果。
相關(guān)產(chǎn)品:
6×DNA Lodding Buffer
EB溶液(10mg/ml)
TAE緩沖液 TBE緩沖液 天津本生公司產(chǎn)品種類已超過萬種,正廣泛應(yīng)用于科研院校、中心實(shí)驗(yàn)室、分子生物學(xué)等科研域。目,公司豐富的產(chǎn)品既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求,也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)模化生產(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。
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